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荧光化学发光凝胶成像系统的各种光源选择

2016-12-16 浏览次数:481

  荧光化学发光凝胶成像系统的各种光源,是其结构和功能的重要组成部分,但与CCD、镜头以及分析软件相比,往往却没有得到应有的重视。我们经常遇到这样的用户,他们知道系统光源出现故障或整个系统报废的时候都不知道凝胶成像透射紫外中有305nm与365nm两种紫外灯管,或者搞不清他们之间有何区别。这其中固然有销售商售后的不到位,但也反映出我们对荧光化学发光凝胶成像系统光源的不重视和缺乏足够的了解,为此我们撰以此文,以期帮助用户厘清他们的区别和各自的作用,让您能够更好的选择购买、使用以及保养维护凝胶成像系统。
  根据应用的不同,往往不同型号凝胶成像产品配有差异性的光源,大致类型可分为白光光源、紫外光源和高强度三色LED灯,其中白光和紫外光源又分别有透射(transilluminate)和反射(Epi)之分。
  下面我们对荧光化学发光凝胶成像系统的各种光源及其用途做简要介绍,首先是双侧反射白光光源,也是我们使用zui多的光源,通常作为系统照明光源使用,即放置或调整DNA胶或蛋白胶位置,或在对镜头调整聚焦时使用,当然在对非透明材质的蛋白胶或其他成像物质进行成像时也需开启反射白光。
  其次透射白光,即通常所说白光板,主要用于蛋白质胶拍摄时使用,因为白光板位于透射紫外灯箱上方,所以为不影响透射紫外光源的使用,同时也更节约室内空间,白光板一般可以折叠竖立在箱体后部。
  透射紫外光源,即紫外透射灯箱,主要用于DNA胶拍摄,由于DNA常用的荧光染料是EB(即Ethidium bromide,溴化乙锭),而用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用带CCD成像头的荧光化学发光凝胶成像系统拍摄到,所以透射紫外的波长通常是305nm段。
  目前,许多厂家设计了双波长的透射紫外灯管(302nm、365nm),其365nm光源主要适用于制备观察以及切割条带,减少对DNA的破坏,并减小对人的伤害。
  紫外反射灯源,一般为选配件,主要原因是其使用并不广泛,只是在非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像才需要使用。往往比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶 与聚丙烯酰胺凝胶,透射光源完全可以满足,所以大部分厂家都只将紫外反射光源作为选配,只是在仪器上预留了位置与接口。
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